SC∕T 7240-2020 牡蛎疱疹病毒I型感染诊断规程(水产)
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ID： |
9CA045D0D2124EABBC466B08A8C200CB |
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文件大小(MB)： |
0.65 |
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页数： |
16 |
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文件格式： |
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日期： |
2021-12-23 |
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ICS 65.020.30,B 41 ←:才H,中华人民共和国水产行业标准,SC/T 7240一2020,牡肺癌殇病毒1 型感染诊断规程,Code of diagnosis for infection with Ostreid herpesvirus 1,2020-08-26 发布2021-01-01 实施,中华人民共和国农业农村部发布,本标准由全国水产标准化技术委员会CSAC/TC 156) 归口,本标准起草单位: 中国水产科学研究院黄海水产研究所,本标准主要起草人， 自昌明、辛鲁生、杨冰、万晓援、王崇明、李晨、梁艳、黄侥,SC/T 7240- 2020,I,SC/T 7240-2020,牡蜘癌摩病毒1 型感染诊断规程,范围,本标准给出了牡甥炮殇病毒1 型(Os tre id herpesvirus 1, OsHV- l)感染的术语和定义、缩略语、试剂,和材料、器材和设备、临床症状与表现， 规定了采样、组织病理检测、PCR 检测、透射电镜检测及综合判定,本标准适用于牡妨痕1$病毒l 刑盹甘' 、气!在r.:始由圣nI,2 规范性引用文件,下列文件对于升,凡是不注日期的引,SC/ T 7011,SC/T 7205.,3,4,下列,bp,DAFA,DNA,dNTPs,EDTA,Epon812,PCR,Tαq 酶:,TE,Tris,Tri s : 三经甲,5 试剂和材料,5. 1 除非另有说明，标准中使用,5. 2 无水乙醇,5.3 TE 缓冲液见附录A 中的A.1 0,5. 4 抽提缓冲液见A. 20,5. 5 蛋白酶K 见A.3 0,5.6 10 mo l/ L 乙酸饺见A.4 ,5. 7 平衡盼,5. 8 盼/氯仿/异戊醇(25 ' 24 ' 1) ,5. 9 氯仿/异戊酶(24 ' 1) 0,5. 10 1 X 电泳缓冲液见A. 5 0,5. 11 70% 乙醇见A. 6 0,xative),l,SC/T 7240-2020,5 12 削TPs(各2. 5 mmol/L) ， 生化试剂，含dATP 、dTTP ， dGTP ， dCTP 各2 . 5 mmol/ L 的混合物. - 20'C,保存，用于PCR ,5. 13 10 X PCR 缓冲液生化试剂，无Mg'\ 随Taq DNA 聚合酶提供， 一20'C 保存,5. 14 MgCl, (25 mmo l/L)生化试剂，一20'C保存,5. 15 Taq DNA 聚合酶(5 U/μ L) ， 生化试剂. - 20'C保存,5. 16 正向引物C2 Cl Oμmo l/L) ,5'-CTCTTTACCATGAAGATACCCACC-3'. - 20'C 保存,5. 17 反向寻 物C6 Cl Oμmo l/L) ， 5' -GTGCACGGCTTACCATTTTT-3'. 一20'C保存,5. 18 PCR 检测阳性对照为己知感染牡蜘痕王若病毒1 型且PCR 结果显示阳性的贝类组织样品，一70'C,保存,5. 19 PCR 检测阴性对照为己知未感染牡妨痕12;病毒l 型且PCR 结果显示阴性的贝类组织样品. - 70'C,保存,5. 20 PCR 检测空白对照以灭菌双蒸水作模板,5. 21 琼脂糖,5. 22 DNA 分子量标准,5 23 筛绢(600 目)过滤海水,5. 24 DAFA 固定液见A.7 囚,5. 25 i号木精染色液见A.8 ,5. 26 1 %伊红储存液见A. 9 ,5. 27 1 %焰红储存液见A. 10 ,5 . 28 伊红焰红染色液见A. ll ,5. 29 95% 乙酿,5.30 85% 乙应见A. 12 ,5. 31 80% 乙醇见A. 13 ,5. 32 75 % 乙醇见A. 14 ,5. 33 50% 乙醇见A. 15 .,5. 34 二甲苯,5. 35 石蜡(熔点52'C~54'C) ,5 36 中性树JJlt ?,5. 37 2 . 5%戊二ll1i见A . 16 .,5. 38 1 %饿酸储存液见A. 17 .,5. 39 丙酬,5. 40 90 %丙酣见A. 18 .,5. 41 70 %丙酣见A. 19.,5. 42 50%丙丽见A. 20 ,5. 43 Epon812 包埋剂,5. 44 醋酸铀染色液见A. 2 1,5. 45 拧核酸铅染色液见A.22 ,6 器材和设备,6. 1 石蜡切片机,6 2 组织、脱水机,SC/T 7240- 2020,6. 3 包埋机,6. 4 染色机,6. 5 展片水浴锅,6. 6 恒温箱,6. 7 平板烘片机,6. 8 显微镜,6.9 PCR 仪,6. 10 电泳仪,6. 11 水平电泳梢,6 12 紫外观察仪或凝胶成像仪,6.13 高速离心机,6.14 微量移液器,6 15 超薄切片机,6. 16 透射电子显微镜,7 临床症状与表现,患病贝类幼虫表现活动力减弱，摄食减少，沉人容器底部;稚贝、幼贝和成贝表现双壳闭合不全，参见,附录B ,B 采样,8. 1 采样对象,牡妨、扇贝、蛤和蜡类等易感双壳贝类，参见附录B。优先选择濒死或双壳闭合不全的贝类样本,82 采样数量、方法和保存运输,应符合SC/ T 7205. 1-2007 中附录B 的要求,8. 3 样品采集,8. 3. 1 幼虫(附着前)使用600 目的筛绢过滤后取幼虫整体，稚贝(附着后至2 mm) 和幼贝(2 mm- 3 cm),取内脏团，成贝(>3 cm ) 取肝膜腺、媳和外套膜,8. 3. 2 适用于组织病理检测的样品包括郎、外套膜和肝膜腺。取2 mm-5 mm 厚组织样本，立即保……
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